細胞粉碎機 DH93-IIDN 用途: ※用于動植物細胞、細菌、芽孢或組織的粉碎,從細胞中提取蛋白質以及進行病毒、疫苗的科學培養(yǎng)實驗。 ※加速化學、物理學等的反應速度和加速液體脫氣。 ※原油稀釋、油水乳化、加速脫晶,玻璃均漿等進行的科研分析。 ※分散稀土,各類無機礦物質,以及配制近納米百分之的乳膠體均化混合物等。 ※模具微孔,盲孔的快速高精洗液。 實驗目的 1、了解超聲細胞破碎的基本原理 2、掌握超聲細胞破碎的基本技術 實驗原理 強聲波作用溶液時,氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關,空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。 材料和試劑 細菌10ml、燒杯、刨冰、75%酒精棉球 探頭型號大小 破碎細胞容量 2mm 150ul-5ml 3mm 200ul-10ml 6mm 10ml-50ml 10mm 50ml-150ml 超聲細胞破碎儀,DH96-IIN基本參數(shù) 型號DH92-IIN 頻率20-25KHz 功率150W 隨機變幅桿Φ6 可選配變幅桿Φ2、3、10、12、15 破碎容量0.5-500ml 占空比1-99 電源220/110V 50Hz/60Hz 電源機箱尺寸400×280×220mm 凈重12.1kg 主機+換能器重量14kg 外包裝尺寸534×295×435mm 產(chǎn)品概述 超聲細胞破碎儀,DH96-IIN是種利用強超聲在液體中產(chǎn)生空化效應,對物質進行超聲處理的多功能、多用途的 儀器,能用于多種動植物細胞、病毒細胞的破碎,同時可用來乳化、分離、勻化、提取、消泡、清洗及加速化學反應等等。被廣泛應用于生物化學、微生物學、藥物化學、表面化學、物理學、動物學等域。 開箱清單 超聲波發(fā)生器臺 振動系統(tǒng)(換能器組件)只 隔音箱臺 十字夾(在隔音箱內)只 試管夾(在隔音箱內)只 電源線根 用扳手(用于拆卸變幅桿)套 保險絲 8A 、各2個 使用說明書份 合格證張 保修卡份 細胞破碎的方法: 、機械破碎法:是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器 等將細胞破碎開來 。 1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。 2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。 二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。 1:用定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細胞壁和細胞器)。 機制:可能與強聲波作用溶液時,氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關,空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。 超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度和細胞類型等。(使用時注意降溫,防止過熱)。 2. 高壓破碎:細胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過程中細胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內含物。 這是種溫和的、破碎細胞的較理想的方法。 3. 反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。 三、化學破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結構遭到破壞或透性發(fā)生改變 。 有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞。濃度般為1mg/ml。 四、酶學破碎法 :選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質體破碎開來 。 細菌細胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。 裂解液標準配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5 Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個pH范圍內比較好發(fā)揮作用) 。 綜合敘述:無論用哪種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以那些活性需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯**化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應該在破碎的同時多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合于目的物質的提取。 使用注意事項: 1.根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當探頭,使用后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛用扳手更換; 2.AMPLITUDE旋鈕打開時,探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應超過10; 3.使用準備好冰盒,樣品處理時置于冰浴中,樣品濃度不可過大。
更新時間:2023/12/9 8:11:34
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