超聲細(xì)胞破碎儀

 

1、了解超聲細(xì)胞破碎的基本原理

 

2、掌握超聲細(xì)胞破碎的基本技術(shù)

 

實(shí)驗(yàn)原理

 

強(qiáng)聲波作用溶液時(shí)，氣泡產(chǎn)生、長(zhǎng)大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān)，空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。

 

材料和試劑

 

細(xì)菌10ml、燒杯、刨冰、75％酒精棉球

 

 探頭型號(hào)大小 破碎細(xì)胞容量

 

 2mm 150ul－5ml 

 

 3mm 200ul－10ml

 

 6mm 10ml－50ml 

 

 10mm 50ml－150ml 

 

超聲細(xì)胞破碎儀,DH96-IIN基本參數(shù)

 

型號(hào)DH92-IIN

 

頻率20-25KHz

 

功率150W

 

隨機(jī)變幅桿Φ6

 

可選配變幅桿Φ2、3、10、12、15

 

破碎容量0.5-500ml

 

占空比1-99

 

電源220/110V 50Hz/60Hz

 

電源機(jī)箱尺寸400×280×220mm

 

凈重12.1kg

 

主機(jī)+換能器重量14kg

 

外包裝尺寸534×295×435mm

 

產(chǎn)品概述

 

      超聲細(xì)胞破碎儀,DH96-IIN是種利用強(qiáng)超聲在液體中產(chǎn)生空化效應(yīng)，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行超聲處理的多功能、多用途的儀器，能用于多種動(dòng)植物細(xì)胞、病毒細(xì)胞的破碎，同時(shí)可用來(lái)乳化、分離、勻化、提取、消泡、清洗及加速化學(xué)反應(yīng)等等。被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、微生物學(xué)、藥物化學(xué)、表面化學(xué)、物理學(xué)、動(dòng)物學(xué)等域。

 

開(kāi)箱清單

 

超聲波發(fā)生器臺(tái)

 

振動(dòng)系統(tǒng)(換能器組件)只

 

隔音箱臺(tái)

 

十字夾（在隔音箱內(nèi)）只

 

試管夾（在隔音箱內(nèi)）只

 

電源線根

 

用扳手（用于拆卸變幅桿）套

 

保險(xiǎn)絲 8A 、各2個(gè)

 

使用說(shuō)明書(shū)份

 

合格證張

 

保修卡份

 

細(xì)胞破碎的方法:

 

、機(jī)械破碎法：是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開(kāi)來(lái) 。

 

1. 高速組織搗碎：將材料配成稀糊狀液，放置于筒內(nèi)約1/3體積，蓋緊筒蓋，將調(diào)速器先撥至慢處，開(kāi)動(dòng)開(kāi)關(guān)后，逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。

 

2. 玻璃勻漿器勻漿：先將剪碎的組織置于管中，再套入研桿來(lái)回研磨，上下移動(dòng)，即可將細(xì)胞研碎，此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高，適用于量少和動(dòng)物臟器組織。

 

二、物理破碎法：指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開(kāi)來(lái)。

 

1：用定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液，使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器）。

 

機(jī)制：可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí)，氣泡產(chǎn)生、長(zhǎng)大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān)，空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。

 

超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類(lèi)型等。（使用時(shí)注意降溫，防止過(guò)熱）。

 

2. 高壓破碎：細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上，被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過(guò)程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化，從而破碎釋放內(nèi)含物。

 

這是種溫和的、破碎細(xì)胞的較理想的方法。

 

3. 反復(fù)凍融法：將細(xì)胞在-20度以下冰凍，室溫融解，反復(fù)幾次，由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。

 

三、化學(xué)破碎法：指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜，使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。

 

有些動(dòng)物細(xì)胞，例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉（SDS）、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度般為1mg/ml。

 

四、酶學(xué)破碎法 ：選用合適的酶，使細(xì)胞壁遭到破壞，進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開(kāi)來(lái) 。

 

細(xì)菌細(xì)胞壁較厚，可采用溶菌酶處理效果更好。

 

裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: ：50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5 Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個(gè)pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。

 

綜合敘述：無(wú)論用哪種方法破碎組織細(xì)胞，都會(huì)使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中，使大分子生物降解，導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少，加入二異丙基氟磷酸（DFP）可以或減慢自溶作用；加入碘乙酸可以那些活性需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲**化物（PMSF）也能清除蛋白水解酶活力，但不是全部，而且應(yīng)該在破碎的同時(shí)多加幾次；另外，還可通過(guò)選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等，使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。

 

使用注意事項(xiàng)：

 

1．根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當(dāng)探頭，使用后均須用酒精棉球擦洗探頭，換探頭須剛用扳手更換;

 

2．AMPLITUDE旋鈕打開(kāi)時(shí)，探頭不得在空氣中暴露，特殊情況下(測(cè)試探頭)不應(yīng)超過(guò)10；

 

3．使用準(zhǔn)備好冰盒，樣品處理時(shí)置于冰浴中，樣品濃度不可過(guò)大。